Rowena Roubaix mengikuti rute bersejarah di Lembah Sungai Columbia, dimulai dan berakhir di The Dalles. Peserta akan melintasi Jalan Raya Sungai Columbia Bersejarah, mendaki Rowena Crest, melanjutkan ke Mosier, menaiki Jalan Dry Creek, dan kembali ke titik awal melalui Rowena Crest. Jumlah putaran rute bergantung pada kategori balapan, dan rute mencakup bagian beraspal dan berkerikil. Peserta harus mandiri, mematuhi peraturan lalu lintas, dan menghormati komunitas lokal. Jalan tetap terbuka untuk lalu lintas, dan melintasi garis kuning ganda akan mengakibatkan diskualifikasi.